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| ThermoFisher | 20148 | LightShift™ Chemiluminescent EMSA Kit |
Thermo Scientific/20148/化學發光試劑盒現貨
Thermo Scientific/20148/化學發光試劑盒現貨
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Thermo Scientific LightShift化學發光EMSA試劑盒是一種非常強勁且靈敏的檢測系統，通過進行電泳遷移率實驗(EMSA)檢測蛋白質-DNA結合相互作用。這個試劑盒包括用于建立和定制DNA結合反應的試劑，用于驗證體系的一組對照DNA和蛋白提取物，作為探針去識別生物素標記靶DNA的穩定鏈霉親和素-HRP偶聯物，以及非常靈敏的用于檢測的化學發光底物。
LightShift 化學發光EMSA試劑盒的特點：
• 檢測胞核抽提物中低豐度蛋白的理想選擇
• 靈敏度超越放射性和地高辛檢測法
• 兼容之前建立的常規DNA-蛋白互作結合條件
• 包括EBNA對照系統，幫助新用戶建立一個適當的檢測體系，了解用于確定相互作用特異性的方法
LightShift EMSA檢測的原理與蛋白免疫印跡類似。生物素末端標記的雙鏈DNA與細胞核提取物或純化的因子共同孵育，之后進行非變性凝膠電泳。然后將DNA快速（30分鐘）轉印至帶正電的尼龍膜上，進行紫外交聯，然后使用HRP標記的鏈霉親和素-HRP偶聯物檢測，再與底物孵育。從標記到獲得結果的整個實驗流程可以在一天內完成。
蛋白與DNA之間的相互作用對于DNA復制、重組和修復、轉錄和病毒組裝等許多細胞進程具有關鍵調控作用。電泳遷移率實驗(EMSA)是研究基因調控和確定蛋白:DNA之間相互作用的核心技術之一。
EMSA技術基于一個實驗發現：即在非變性聚丙烯酰胺凝膠或瓊脂糖凝膠電泳過程中，蛋白:DNA復合物的遷移速度比自由的DNA分子更慢。由于蛋白結合使DNA的遷移速率發生了偏移或延遲，這個方法也被稱為凝膠遷移或凝膠阻滯分析。在EMSA技術出現之前，蛋白:DNA之間相互作用主要是通過硝化纖維素膜過濾實驗分析。
整個實驗中需要實驗者準備的是已純化的末端生物素標記的目標DNA，待檢測的蛋白提取物，尼龍膜和基本電泳設備。目標DNA可在合成的同時進行5'或3'端生物素標記，或在合成之后使用Thermo Scientific生物素3'末端DNA標記試劑盒（產品貨號89818）進行標記。用戶可通過不同方法獲得胞核、胞質或全細胞蛋白提取物，包括Thermo Scientific NE-PER 核蛋白和胞質蛋白提取試劑盒（產品貨號78833）。
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