Qubit熒光計配套檢測試劑盒如何挑選？

蘇州螞蟻淘生物科技有限公司代理銷售賽默飛invitrogen公司的Qubit熒光計配套檢測試劑盒。

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該類試劑盒分型很多，許多客戶不知道如何挑選，現(xiàn)整理如下：

靈敏的靶向特異性定量試劑

Invitrogen qubit檢測試劑運用簡易的混合-讀數(shù)形式，可使用qubit熒光定量儀進行讀數(shù)，僅需低至2分鐘的孵育時間。 qubit檢測試劑盒中使用的染料僅會在與靶向分子發(fā)生特異性結(jié)合時發(fā)出熒光，從而小化污染物（包括降解DNA或RNA）對結(jié)果的影響。

qubit檢測試劑盒

qubit檢測試劑盒提供了濃縮的檢測試劑、稀釋緩沖液和預(yù)稀釋的標準品。 只需簡單地使用已提供的緩沖液對試劑進行稀釋，加入您的樣品（從1 μL至20 μL的任意體積均可），然后就可使用Invitrogen qubit 4型熒光定量儀讀取濃度值（圖1）。 該檢測在室溫下即可進行，信號可保持3小時穩(wěn)定。

所有的qubit檢測均依照相同的常規(guī)操作流程進行，運用簡易的混合-讀取形式，對于DNA和RNA檢測僅需2分鐘的孵育時間，對于蛋白質(zhì)檢測需要孵育15分鐘。 qubit 4型熒光定量儀自帶可支持多達1000例樣品數(shù)據(jù)的存儲容量，您也可以使用USB數(shù)據(jù)線或USB移動存儲設(shè)備來轉(zhuǎn)移數(shù)據(jù)。

除了用于dsDNA、寡核苷酸、總RNA、microRNA、蛋白質(zhì)的核心檢測試劑外，也可使用Ion Sphere質(zhì)控試劑盒，在使用Ion Personal Genome Machine（PGM）測序儀進行測序前，通過qubit 4型熒光定量儀對Ion Sphere的微粒質(zhì)量進行評估。



圖 1. qubit定量檢測流程。 結(jié)合qubit 4型熒光定量儀使用時，Invitrogen qubit定量檢測試劑盒擁有無縫的工作流程，可輕松完成數(shù)據(jù)收集。 qubit檢測試劑盒提供了濃縮的檢測試劑、稀釋緩沖液和預(yù)稀釋的標準品。 只需簡單地使用已提供的緩沖液對試劑進行稀釋，加入您的樣品（從1 μL至20 μL的任意體積均可），然后就可使用qubit 4型熒光定量儀讀取濃度值。 該檢測在室溫下即可進行，信號可保持3小時穩(wěn)定。

敬請注意： 除microRNA及Myqubit檢測試劑盒外，所有的qubit檢測試劑盒均可用于Invitrogen qubit 3.0及2.0款熒光定量儀，以及初的Invitrogen qubit（1.0）熒光定量儀。microRNA及Myqubit檢測試劑盒僅適用于qubit 4、3.0及2.0型熒光定量儀，而RNA IQ檢測試劑盒僅適用于qubit 4型熒光定量儀。

您是否需要更高通量的定量方法？

當您需要定量1-20個樣品時，qubit檢測試劑是非常合適的（使用qubit 4型熒光定量儀進行讀數(shù)）。
而對于20-2000+例樣品，您可使用用于使用微孔平板進行核酸定量或蛋白質(zhì)定量的Invitrogen Quant-iT檢測試劑盒和試劑。

            根據(jù)靶向分子選擇qubit檢測試劑盒

1、dsDNA

Invitrogen qubit dsDNA BR（寬檢出范圍）試劑盒和HS（高靈敏度）試劑盒經(jīng)專門設(shè)計，可輕松進行的DNA定量。 相比RNA，這些試劑盒對于雙鏈DNA（dsDNA）有著高度選擇性。 該檢測試劑盒對于常見污染，如鹽、自由核苷酸、溶劑、變性劑或蛋白質(zhì)等，有著很好的適應(yīng)性。

為了測定樣品純度，您可以配合使用Invitrogen qubit dsDNA檢測試劑盒和qubit RNA檢測試劑盒。 這些檢測方法相比A₂₆₀/A₂₈₀檢測方法可以為您更好地指示樣品純度。 要檢測核酸樣品中的蛋白污染，只需簡單地將1至20 μL樣品加入至Invitrogen qubit蛋白檢測試劑中即可。

產(chǎn)品	貨 號	檢測試劑編號	定量范圍	研究應(yīng)用
qubit dsDNA BR檢測試劑盒	Q32850	100	2-1,000 ng	基因組DNA和少量純化DNA樣品的定量
	Q32853	500
qubit 1x dsDNA HS檢測試劑盒	Q33230	100	0.2-100 ng	PCR產(chǎn)物、病毒DNA或NGS樣品的定量
	Q33231	500
qubit dsDNA HS分析試劑盒	Q32851	100	0.2-100 ng	量化PCR產(chǎn)物，病毒DNA或NGS樣品
	q32854	500

 

2、總RNA

qubit RNA iQ檢測試劑可對RNA完整度和質(zhì)量進行高度和靈敏的測定，可用于如二代測序和RNA測序等重要應(yīng)用。  準確了解有多少可用RNA和降解RNA現(xiàn)在可以非常簡單快速，只需花費5分鐘進行混合和讀數(shù)即可得到結(jié)果。 Invitrogen qubit RNA XR（擴展范圍）試劑盒和HS（高靈敏度）試劑盒可輕松進行的RNA定量。 相比雙鏈DNA（dsDNA），這些試劑盒對于RNA有著高度選擇性，其中BR檢測試劑可完成樣品原始濃度在1 ng/μL至1 μg/μL內(nèi)的測定，檢測范圍為20–1000 ng，而HS檢測試劑則可用于樣品原始濃度在250 pg/μL至100 ng/μL內(nèi)，檢測范圍為5–100 ng的測定。 該檢測試劑盒對于常見污染，如鹽、自由核苷酸、溶劑、變性劑或蛋白質(zhì)等，有著很好的適應(yīng)性。

為了測定樣品純度，您可以配合使用qubit dsDNA檢測試劑盒和qubit RNA檢測試劑盒。 這些檢測方法相比A₂₆₀/A₂₈₀檢測方法可以為您更好的指示樣品純度。 要檢測核酸樣品中的蛋白污染，只需簡單地將1至20 μL樣品加入至qubit蛋白檢測試劑中即可。

產(chǎn)品	貨 號	檢測試劑編號	定量范圍	研究應(yīng)用
qubit RNA IQ檢測試劑盒	Q33221	75	N/A	評估用于測序、微陣列檢測和RT-PCR的RNA質(zhì)量
	Q33222	275
qubit RNA XR檢測試劑盒	Q33223	100	20 ng–8 µg	對RNA測序，微陣列，RT-PCR和qRT-PCR進行定量分析
	Q33224	500
qubit RNA BR檢測試劑盒	Q10210	100	20-1,000 ng	對測序、微陣列檢測、RT-PCR和northern雜交的樣品進行定量
	Q10211	500
qubit RNA HS檢測試劑盒	Q32852	100	5-100 ng
	Q32855	500

 

3、microRNA

Invitrogen qubit microRNA檢測試劑盒設(shè)計用于對如microRNA等小RNA（17–25 nt或bp）進行簡易的定量，即使存在如鹽、自由核苷酸、溶劑、去污劑或蛋白質(zhì)等常規(guī)污染等也可完成測定。 相比rRNA或較大的mRNA (>1,000 bp)，該檢測試劑對于小RNA有高度選擇性。 我們可以對樣品管中低至0.5 ng水平的純化樣品中的小RNA進行高重復(fù)性的定量（按照已提供的用戶手冊中的實驗流程進行）。 這款檢測試劑可檢測所有類型的小RNA，包括microRNA和siRNA，單鏈或雙鏈均可。 該檢測試劑在核心檢測范圍內(nèi)的動態(tài)檢測范圍為5 ng/mL至500 ng/mL (1–500 ng) ，而在擴展檢測范圍內(nèi)可檢測低至2.5 ng/mL (0.5 ng) 的樣品。 該檢測試劑可完成樣品原始濃度在0.05 ng/μL至100 ng/μL內(nèi)的測定。

• 請閱讀BioProbes 70文章 - 傳統(tǒng)和高通量測定法的基于熒光的小RNA定量

產(chǎn)品	貨 號	檢測試劑編號	定量范圍	研究應(yīng)用
qubit microRNA檢測試劑盒	Q32880	100	1-100 ng	對微陣列檢測、qRT-PCR和測序的樣品進行定量
	Q32881	500

 

4、ssDNA

Invitrogen qubit ssDNA檢測試劑盒使得DNA定量更輕松更。 該檢測試劑可完成樣品原始濃度在50 pg/μL至200 ng/μL內(nèi)的測定，檢測范圍為1–200 ng。 該檢測在室溫下即可進行，信號可穩(wěn)定保持30分鐘。 該檢測試劑盒對于常見污染，如鹽、自由核苷酸、溶劑、去污劑或蛋白質(zhì)等，有著很好的適應(yīng)性。

產(chǎn)品	貨 號	檢測試劑編號	定量范圍	注
qubit ssDNA檢測試劑盒	Q10212	100	1-200 ng	可用于寡核苷酸、引物、變性DNA、PCR產(chǎn)物的定量

 

5、蛋白質(zhì)

Invitrogen qubit蛋白質(zhì)檢測試劑盒使得蛋白質(zhì)定量更輕松更。 該檢測試劑可完成樣品原始濃度在12.5 μg/mL至5 mg/mL內(nèi)的測定，表現(xiàn)出較低的蛋白質(zhì)間差異。 該檢測試劑對于常見污染，如還原性試劑（DTT、β-巰基乙醇）、鹽、自由核苷酸、氨基酸、溶劑和DNA等（不包括去污劑），有著良好的適應(yīng)性；對于其他污染，需要輕微修改實驗流程。

產(chǎn)品	貨 號	檢測試劑編號	定量范圍	注
qubit 蛋白質(zhì)檢測試劑盒	Q33211	100	0.25-5 µg	存在DTT、β-巰基乙醇、氨基酸、DNA的情況下保持
	Q33212	500